周艳芝，方惠娟，邓晓辉，张玲
(甘肃省妇幼保健院，甘肃兰州 730050)
出版源:中国消毒学杂志 , 2017 , 34 (4)
二氧化氯在医疗器械领域二氧化氯多应用于环境物体表面和耐腐蚀医疗器械消毒且具有较好的消毒效果，目前国内市场二氧化氯消毒产品众多,用途广泛，选用合适的二氧化氯消毒产品是保证消毒效果的重要环节。本研究选择一种二氧化氯泡腾片，对其水溶液对木质台面和织物的消毒效果及其安全性进行了实验室观察。
1．1试验材料
试验用二氧化氯泡腾片为白色固体一元片剂有效氯含量为10.63％，崩解时间≤3min，溶解后为淡黄色透明溶液，有轻微氯臭味，有效氯含量100mge。l的水溶液ph值约为3.74，使用之前不用活化，直接投入规定体积纯化水中，等其崩解完毕后直接使用。
试验用标准菌株为金黄色葡萄球菌(atcc—6538)和大肠杆菌(8099)，由中国普通微生物菌种保藏中心提供；spe级icr种小鼠(济南鹏悦动物繁育有限公司，生产许可证号：syxk(鲁)2014—0003号)；普通级新西兰大白兔(山东省农业科学院，生产许可证号：scxk(鲁)2009—0013号)。
1.2试验菌悬液制备
按2002年版《消毒技术规范》的标准方法制备试验用细菌悬液，活菌计数以后待用。
1.3 中和剂鉴定试验
以配制的金黄色葡萄球菌悬液作定量杀菌试验程序中和剂鉴定试验的指标菌载体，分为6组试验，重复3次。以第一组无菌或菌落数量远少于第2组，第2组菌落数比第l组多，比后几组都少，第3、4、5各组组内生长的细菌菌落数相差对比不超过15％，第6组内培养完成后无菌落生长，3次试验完成对比结果均符合上述情况，为所选中和剂适宜。
1.4定量杀菌试验
配制1.25倍试验浓度二氧化氯泡腾片溶液和菌悬液，放在20℃水浴锅内恒温水浴5min。向试管内加入恒温水浴的4.0ml消毒液溶液(阳性试验物设为同量的tps)与1.0ml的菌悬液，震荡并计时。作用一定时问，将0.5ml恒温过后的菌液混合液加入到含4.5ml中和剂试管内，混匀，中和10min，进行平板接种，活菌培养计数，计算杀灭对数值。试验重复3次。
1.5物体表面消毒现场试验
选择医院办公用木质桌面为检测对象，标定面积5cm×5cm正方形区域2块，其中一个供消毒处理之前的自然菌样采集，另外一个供经100mg／l浓度样品溶液涂擦消毒后的菌样采集。采集和稀释培养方法依照《消毒技术规范》2.1.2.10，平行试验30组。观察记录试验结果，进行木质表面消毒现场效果评定。
1.6织物消毒模拟现场试验
将灭菌白色布片滴染0.01ml菌液后，放置37℃恒温箱干燥；然后将菌片放人小布袋中，每袋放入3个菌片，分别将10个放有菌片的小布袋放入5件白色工作服的左右口袋内。将准备好的白色工作服浸入规定浓度消毒液中，作用30min，反应10min。阳性对照组为将放有3片干燥染菌布片的小布袋放人无菌标准硬水中，进行无菌中和反应10min；同一批次的培养基作为阴性组。
1.7毒性试验
1.7.1急性经口毒性试验试验时取二氧化氯泡腾片。spe级icr种小鼠各25只随机分成雌雄各一半的5组，每组10只。采用霍恩氏法，设受试物为5个剂量，分别为1 000、2 150、4 640、10 000、21 500 mg,／(kg.bw)体重(分别取受试物2 000、4 300、9 280、20 000、43 000。mg加去离子水均至40m1)，小鼠体重19.5～21.1g，将受试物给动物灌胃，灌胃量以小鼠重量按比例0.2 ml／／10 g计算。动物试验前禁食过夜。染毒后，随时注意动物一般状态和异常情况，观察期限为14d。记录试验结果，计算后进行结果评定。
试验时取576.7mg样品溶于10(】mi纯化水中制取消毒剂溶液。选用spe级icr种小鼠20只，雌雄各半，采用较大限量法，设受试物5000mg／(kg.bw)体重(5000mg／20m1)。小鼠体重18～22g，将受试物给动物灌胃，灌胃量以小鼠重量按比例0.2ml/10g计算。动物试验前禁食过夜。染毒后，随时注意动物一般状态，其他异常情况，观察期限为14 d。记录试验结果，计算后进行结果评定。
1.7.2一次完整皮肤刺激试验取576.7mg样品溶于100ml纯化水中制取溶液。普通级新西兰大白兔3只，体重2.7～3.0kg，室温23℃，相对湿度53％。试验前一天将家兔背部脊柱两侧左右各约3cm×3cm毛剪掉。试验时，采用自身对照法，取0.5ml样品溶液涂在右侧暴露皮肤上，左侧处理去毛皮肤涂等量纯化水作对照试验，均用一层斑贴纸覆盖其上，固定，涂抹后4h用纯化水清洗。除去涂抹物后1h、1d、2d整时间记录试验结果。根据《消毒技术规范》中的表2.11、表2.12进行结果评测。
1.8统计学方法
将原始检测记录数据导人excel表格，然后对数据进行统计和描述性分析。
2 结果
2.1 中和剂鉴定结果
在20～21℃条件下，含2.5∥l的硫代硫酸。钠、0.25∥l卵磷脂和5∥l吐温80的pbs可有效中和二氧化氯泡腾片溶液残留对金黄色葡萄球菌的杀灭作用，对试验菌以及培养基无明显影响，符合中和剂要求(表1)。
2.2定量杀菌试验结果
试验表明，此二氧化氯泡腾片溶液浓度为100mg／l时，作用一定时间，对悬液内大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀灭对数值平均值>5.00(表2)。
2.3 消毒现场试验结果
试验表明，浓度为100 mg／l二氧化氯泡腾片溶液对木质的台面擦拭消毒，作用30min，各次试验杀灭对数值平均值为2.76。使用100mg／l该泡腾片溶液对织物浸泡消毒，持续30min，对金黄色葡萄球菌平均杀灭对数为6.27，对大肠杆菌平均杀灭对数值为6.35。
2.4毒理试验结果
2.4.1急性经口毒性试验多剂量组试验发现，观察受试后spe级icr种小鼠，部分剂量出现不安，呆滞，运动失调，呼吸困难和腹部肿胀小鼠，4 h后出现小鼠死亡。ld，o值为4 027 mg／(kg’bw)，可信限2 270～5 590 rag／(kg.bw)，实际属于低毒级。
高应用浓度5倍溶液经口试验表明，动物无不良反应和异常表现。试验期满对所有小鼠进行解剖，观察组织无异常，ld，。>5 000 mg／(kg。bw)。
2.4.2一次完整皮肤刺激试验试验结果表明，有效成分浓度5倍大应用浓度的二氧化氯泡腾片溶液动物皮肤刺激反应积分等于0，为无刺激性。
3讨论
当前二氧化氯国内产品种类众多，有二元二氧化氯粉剂消毒也有二氧化氯气体发生器消毒等使用消毒效果差别较大。该院常规环境消毒大量使用84消毒液，存在有残留，对环境危害影响较大以及运输储存不方便的问题。在经过对比和查找资料后，拟采用二氧化氯泡腾片进行常规卫生消毒和衣物消毒使用。经测试选用的二氧化氯泡腾片后发现，泡腾分解速度快，无需活化，使用方便，以大使用浓度100mg／l计算，一片即可配制1000ml，一瓶共计100片，大大减少消毒过程出储运的负担。理化性质，消毒水平等均达到预期效果。100mg／l样品溶液呈淡黄色透明溶液，在此较低浓度就可以对物体表面以及织物细菌有较强的杀灭作用。使用一段时间后，使用方便的特性和去除异味的性质也有良好的体现。毒性低，对环境影响小是二氧化氯的重要特点。在医院消毒使用过程中，可有效减少因常规消毒流程对空气环境，地面环境等造成的污染。
在实际使用过程中，泡腾配制的二氧化氯溶液，储存在棕色玻璃瓶中可有效储存1d，长时间储存易造成含量下降，所以好现用现配。二氧化氯泡腾片放置在常温常态下，4h内即可吸潮自行分解，所以在开盖启封使用过程中，要及时关闭瓶盖，开启后尽快使用。
